توالی یابی، کلون سازی و بیان ژن پپتید مشابه کلروتوکسین عقرب mesobutus eupeus ایرانی

از شناخت خواص دارویی و درمانی سم عقرب زمان زیادی می گذرد. هر گونه عقرب می تواند تا بیش از 100 پپتید مختلف داشته باشد. خصوصیات ضد صرعی، ضد سرطانی و حشره کشی سموم عقرب در مقالات مختلف مورد تأیید قرار گرفته است. نوروتوکسین جدیدی با زنجیره کوتاه دارای 36 اسید آمینه و به نام ( (ctxکلروتوکسین از زهر عقرب leiurus quinquestriatus متعلق به خانواده ی buthidae می تواند کانال های یون کلر را مهار کند. در این تحقیق تولید سم کلروتوکسین از پپتیدهای موجود درسم عقرب با تأکید بر خواص ضد متاستازی آن روی سلول های گلیومای بدخیم، به روش مهندسی ژنتیک مورد نظر قرار گرفت. در ابتدا با بررسی توالی های مختلف گزارش شده، پرایمرهای مورد استفاده برای کلروتوکسین طراحی شد و پس از استخراج rna از غدد سم ساز عقرب ایرانی mesobuthus eupeus و سنتز cdna، ژن هدف با pcr تکثیر گردید. قطعه ی مورد نظر با موفقیت در سیستم pet کلون شده و بررسی های بیوانفورماتیکی توالی مورد نظر و مقایسه با دیگر گونه های عقرب که تاکنون مورد بررسی قرار گرفته اند، نشان دهنده تفاوت در توالی آمینواسیدی این پپتید بود. بیان کلروتوکسین در میزبان bl21 با استخراج پروتئین کل و با استفاده از ژل sds-page با غلظت 15? کنترل شد. با توجه به اهمیت سم کلروتوکسین در درمان سرطان های مختلف به خصوص تومورهای دستگاه عصبی، پس از تولید و تخلیص این پپتید می توان آن را در تیمار سلول های سرطانی مورد بررسی قرار داد.